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原位杂交仪的应用有哪些?

发布时间:2022-10-14      点击次数:210
一、原位杂交仪应用
①细胞特异性mRNA转录的定位,可用于基因图谱,基因表达和基因组进化的研究;
②感染组织中病毒DNA/RNA的检测和定位,如EB病毒mRNA、人类乳头状瘤病毒和巨细胞病毒DNA的检测;
③癌基因、抑癌基因及各种功能基因在转录水平的表达及其变化的检测;
④基因在染色体上的定位;
⑤检测染色体的变化,如染色体数量异常和染色体易位等;
⑥分裂间期细胞遗传学的研究,如遗传病的产前诊断和某些遗传病基因携带者的确定,某些肿瘤的诊断和生物学剂量测定等。
二、注意事项
1、固定液的选择及固定时间  石蜡组织建议用10%中性缓冲福尔马林固定6~48h,其它固定液对实验结果可能产生一定的影响。  组织离体后应尽快固定,建议在标本离体后30min内固定。如样本固定不及时,荧光信号会减弱。  固定液的体积是组织体积的4~20倍,否则固定不充分,容易出现无信号或者信号很弱的现象。  而且,为了保证信号的准确性,蜡块最好在2年内进行检测,已经切好的切片在6周内检测最佳。
2、组织切片和载玻片的选择  组织切片4~5μm 厚,过厚或过薄的切片均会对信号的强弱产生影响,而且切片应完整,质量良好,否则会在预处理时掉片。  载玻片的选择建议使用防脱载玻片,有条件的实验室可使用更好的阳离子或者阴离子专用载玻片,可有效防止脱片现象的发生。  
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