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如何提高ELISA试剂盒在使用中的精确度

发布时间:2022-07-06      点击次数:93
  随着科学技能和新式工业的发展,对化学试剂的纯度、净度以及精密度要求愈加严格和专门化。对试剂的加强管理。免疫检测法的精确性表现为单次试验孔间(批内)的重复性和多次试验之间(批间)的重复性。CV值高则表明精确度低,ELISA试剂盒一般由以下两个原因造成:洗刷技能和移液技能。
 
  一、洗刷技能:
 
  1. 假如运用自动洗板机或多通道移液器,请保证进出口能正常运作。
 
  2. 最后一次洗刷后,翻转酶标板倒出剩余的洗刷液,并在吸水纸上拍干液体。洗板太快或太慢都会降低精确度。不能让孔内液体天然风干,需立即进行下一步操作。
 
  3. 依照阐明书,添加足量的洗刷液至孔内,并保证洗刷完全。
 
  4. 由于洗刷液不是通用的,当试剂盒内的洗刷液用完时,请不要运用其他试剂盒中的洗刷液。如有需求,可联络技能支持寻求协助。
 
  5. 不要减少洗刷时的浸泡时间或越过浸泡的过程。
 
  6. 依照阐明书上引荐的洗刷次数清洗,随意改变洗刷的次数会影响试验的精确性。
 
  二、移液技能:
 
  1. 移液时,枪头应对准孔中央,防止接触孔壁及底部。
 
  2. 移液后轻轻晃动混匀试剂。
 
  3. 假如您的样品具有黏性,请预先润洗枪头以消除表面张力的影响。吸液时等待顷刻使体积平衡后再取出。
 
  4. 移液不充分或移液体积不均,阐明移液器需求校正。必要时请查看移液器并重新校正。
 
  5. 加样时,不同的试剂标准品和样本间都要保证更换枪头,防止穿插污染。
 
  6. 保证运用适宜的枪头。ELISA试剂盒不适宜的枪头无法正确量取吸液和加样的体积。
 
  三、封板覆膜:
 
  运用过的封板覆膜可能含有上一步试验残留的试剂,假如重复运用会造成孔板污染,从而导致精确性低。建议每一次孵育运用新的封板覆膜。
 
  四、贮液瓶:
 
  为防止污染,不同的试剂运用不同的贮液瓶。一些试剂或样本很容易被污染(比如唾液、氧化剂等),请参考阐明书操作。必要时候采纳一些预防措施维护溶液。
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